人結(jié)腸癌細(xì)胞，HCT-15

細(xì)胞名稱：人結(jié)腸癌細(xì)胞；HCT-15
組織來源：結(jié)腸癌細(xì)胞
培養(yǎng)條件：RPMI-1640+10%FBS
形態(tài)：貼壁；上皮細(xì)胞樣
背景：細(xì)胞呈CSAp陰性(CSAp-)；角蛋白陽性。
Cells-0098 HCT-8(人盲腸腺癌細(xì)胞) 500000cells/瓶
細(xì)胞名稱：人盲腸腺癌細(xì)胞；HCT-8
組織來源：盲腸腺癌細(xì)胞
培養(yǎng)條件：RPMI-1640+10%FBS
形態(tài)：貼壁；上皮細(xì)胞樣
背景：HCT-8與HRT-18是一樣的。角蛋白免疫過氧化物酶染色陽性。
Cells-0099 HEC-1-A(人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞) 500000cells/瓶
細(xì)胞名稱：人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞；HEC-1-A
組織來源：子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞
培養(yǎng)條件：McCoy’s+10%FBS
形態(tài)：貼壁；上皮細(xì)胞樣

動物細(xì)胞培養(yǎng),大致的步驟是這樣:

1.從動物胚胎或者一些剛出生的動物的器官或者組織上取得細(xì)胞,配制成細(xì)胞懸浮液.把細(xì)胞液放到培養(yǎng)瓶中,在培養(yǎng)箱里培養(yǎng)--------原代培養(yǎng).

但是,不要以為這樣就能一直無限培養(yǎng)下去.

因?yàn)?/span>人結(jié)腸癌細(xì)胞，HCT-15在那個瓶壁上生長的時候,如果大量增殖,細(xì)胞之間會彼此相碰,細(xì)胞細(xì)胞就會停止分裂增殖,出現(xiàn)一種接觸抑制.

2.我們?yōu)榱怂鼈兡芾^續(xù)增殖,就用胰蛋白酶再把它們分開,然后再配制成細(xì)胞懸浮液,分開裝到好幾個瓶子里繼續(xù)培養(yǎng)--------傳代培養(yǎng).

1.      棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。

2.      加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.      按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.      將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。
 
注意事項(xiàng)：
1. 收到細(xì)胞后，若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染，請立即與我們聯(lián)系。
2. 所有動物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級生物安全臺內(nèi)操作，并請注意防護(hù)，所有廢液及接觸過此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。